本书将纳米技术概念引入动物疫苗研究领域在国内尚属首次，共包括14章，详细介绍了病毒样颗粒的基本特征及其在基础研究、药物呈递、疫苗工程等方面的应用价值，系统描述了应用杆状病毒-昆虫细胞表达系统、酵母表达系统、活病毒载体表达系统、哺乳动物细胞表达系统、植物表达系统、原核表达系统、无细胞蛋白质合成表达系统等制备病毒样颗粒的策略、步骤或程序，同时还介绍了目的蛋白纯化鉴定的基本方法及产业化生产病毒样颗粒应注意的问题和解决思路。
样章试读
目录
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第一章绪论1
第一节病毒样颗粒的概念及特点1
一、病毒样颗粒的概念1
二、病毒样颗粒的特点及优势1
三、病毒样颗粒的不足2
第二节病毒样颗粒的分类3
第三节病毒样颗粒的发展历程3
一、病毒样颗粒技术的进展3
二、病毒样颗粒相关表达系统的发展4
三、病毒样颗粒组装技术的发展5
参考文献6
第二章杆状病毒-昆虫细胞表达系统9
第一节概述9
一、杆状病毒-昆虫细胞表达系统的优点9
二、杆状病毒载体9
三、宿主11
四、外源基因的表达13
第二节杆状病毒-昆虫细胞表达技术13
一、杆状病毒-昆虫细胞表达系统的发展13
二、高效表达策略15
第三节Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的VLP制备17
一、载体的选择17
二、目的基因的克隆21
三、培养昆虫细胞21
四、重组bacmid的构建21
五、使用PCR分析重组质粒22
六、VLP的制备23
第四节杆状病毒-昆虫细胞表达系统在VLP研究中的进展24
一、无囊膜病毒26
二、囊膜病毒28
三、瓶颈和问题30
四、展望34
五、附录34
参考文献41
第三章酵母表达系统44
第一节概述44
一、酵母表达系统简介44
二、常用酵母表达系统分类47
第二节酵母表达技术55
一、酵母表达技术概述55
二、酵母表达技术的高效表达策略56
第三节酵母表达系统在VLP研究中的进展61
一、概述61
二、酵母表达系统在人源病毒VLP中的研究62
三、酵母表达系统在动物病毒VLP中的研究65
第四节展望68
参考文献69
第四章活病毒载体表达系统74
第一节痘病毒表达系统74
一、痘病毒的分类74
二、痘病毒基因组特点74
三、痘病毒表达载体及其应用75
第二节腺病毒表达系统80
一、腺病毒生物学特点80
二、腺病毒的分类81
三、腺病毒感染及免疫应答机制83
四、重组腺病毒的构建85
五、腺病毒表达系统在VLP研究中的进展85
第三节腺相关病毒表达系统86
一、腺相关病毒病原学特点87
二、腺相关病毒衣壳组装87
三、腺相关病毒诱导的免疫应答88
四、重组腺相关病毒制备89
五、腺相关病毒递送系统的应用92
六、腺相关病毒递送系统发展展望94
第四节慢病毒表达系统94
一、慢病毒表达系统概述95
二、重组慢病毒制备与生产97
三、慢病毒表达系统的应用101
四、慢病毒载体系统发展展望103
五、附录103
参考文献105
第五章哺乳动物细胞表达系统108
第一节CHO细胞表达系统108
一、CHO细胞表达载体特征111
二、宿主细胞的优化113
三、真核表达载体转染技术113
四、哺乳动物细胞培养条件115
五、CHO制备VLP研究的进展116
第二节HEK293细胞表达系统119
一、HEK293细胞系发展历史119
二、HEK293细胞表达载体特征121
三、HEK293生产蛋白质制剂的优点122
四、HEK293真核表达载体的转染123
五、HEK293细胞制备VLP的研究进展123
第三节细胞培养工艺研究129
一、细胞培养环境的控制129
二、生物反应器130
三、动物细胞流加培养工艺131
四、流加培养的细胞代谢及其基因调控132
第四节稳定表达重组蛋白的哺乳动物细胞系133
一、利用绿色荧光蛋白（GFP）构建稳定表达细胞系134
二、利用慢病毒转导构建稳定表达细胞系135
三、利用噬菌体φC31整合酶构建稳定表达细胞系135
四、利用转座子构建稳定表达细胞系136
五、问题136
第五节展望136
参考文献137
第六章植物表达系统140
第一节植物表达系统概述140
一、植物表达系统的组成140
二、植物表达系统种类142
第二节植物表达系统表达技术143
一、植物表达系统常用载体及工程菌株143
二、提高目的蛋白表达水平的手段146
三、植物表达系统表达重组蛋白纯化工艺149
第三节植物表达系统在VLP中的研究进展151
一、囊膜病毒153
二、无囊膜病毒159
第四节展望162
参考文献163
第七章原核表达系统166
第一节大肠杆菌表达系统概述及技术166
一、大肠杆菌表达系统的组成166
二、大肠杆菌表达系统高效表达的策略169
三、VLP在大肠杆菌表达系统中的表达与组装173
第二节其他原核表达系统（乳酸菌、链霉菌）概述及技术174
一、乳酸菌175
二、链霉菌179
第三节原核表达系统在VLP中的研究进展181
一、囊膜病毒181
二、无囊膜病毒184
第四节展望189
参考文献190
第八章无细胞蛋白质合成系统195
第一节无细胞蛋白质合成系统发展史195
第二节无细胞蛋白质合成系统的优点和不足197
一、CFPS的优点197
二、CFPS存在的问题197
第三节无细胞蛋白质合成系统分类及研究进展198
一、细胞提取物来源CFPS199
二、“PURE”系统CFPS203
三、CFPS的生产方式204
第四节CFPS的主要应用领域205
一、特殊蛋白质的合成205
二、蛋白质高通量表达和筛选206
三、合成药物207
第五节CFPS在VLP制备中的研究进展207
一、无囊膜病毒207
二、囊膜病毒209
第六节展望212
参考文献212
第九章病毒样颗粒的表征技术215
第一节概述215
第二节生物化学分析技术216
一、MS技术216
二、SDS-PAGE技术218
三、RP-HPLC技术219
第三节生物物理学分析技术220
一、TEM220
二、Cryo-EM221
三、AFM222
四、DLS技术224
五、圆盘离心技术225
六、ES-DMA技术226
七、AF4技术227
八、Native-PAGE技术229
九、密度梯度离心技术229
十、AUC技术232
第四节免疫生物学分析技术234
一、ELISA技术234
二、SPR技术235
参考文献237
第十章动物病毒样颗粒疫苗241
第一节VLP疫苗概述241
一、VLP疫苗的优势241
二、VLP疫苗的多样性242
三、VLP疫苗的应用246
四、VLP疫苗的分类249
五、展望251
第二节VLP的免疫机制251
一、抗原呈递细胞的种类、功能251
二、抗原呈递细胞在VLP疫苗免疫中的作用254
三、B细胞及VLP诱导的B细胞免疫应答255
四、主要组织相容性复合体257
五、抗原呈递途径258
六、T细胞及VLP诱导的T细胞免疫应答259
第三节VLP疫苗的研究261
一、人类与人畜共患病VLP疫苗262
二、猪的VLP疫苗274
三、反刍动物的VLP疫苗279
四、禽类的VLP疫苗282
五、兔、鱼、犬、貂和猫的VLP疫苗287
参考文献292
第十一章病毒及病毒样颗粒作为纳米药物递送载体305
第一节纳米药物递送系统概述305
一、纳米药物递送系统305
二、常见纳米药物递送载体的分类及特性311
三、病毒及病毒样颗粒类纳米药物递送载体314
第二节病毒及病毒样颗粒承载药物的机制和原理316
一、从材料学与化学的角度看VNP/VLP316
二、VNP/VLP的解离-自组装特性317
三、物理吸附法317
四、化学修饰法318
第三节病毒及病毒样颗粒作为纳米药物递送载体的研究进展322
一、植物VNP/VLP作为纳米药物递送载体322
二、人/动物VNP/VLP作为纳米药物递送载体334
三、噬菌体VNP/VLP作为纳米药物递送载体340
四、展望345
参考文献345
第十二章病毒样颗粒作为核酸的递送载体348
第一节核酸类药物简介348
一、核酸类药物与基因治疗348
二、核酸类药物的现状和前景349
三、核酸类药物递送载体研究现状350
四、病毒样颗粒作为核酸类药物递送载体352
第二节病毒样颗粒递送核酸的机理和方法353
一、病毒样颗粒递送核酸的机理353
二、病毒样颗粒递送核酸的方法356
第三节病毒样颗粒递送DNA的研究进展357
一、病毒样颗粒递送DNA的研究358
二、病毒样颗粒递送DNA在人类病毒中的应用360
第四节病毒样颗粒递送RNA的研究进展365
一、病毒样颗粒递送RNA在人和动物中的应用365
二、病毒样颗粒递送RNA在植物中的应用367
三、病毒样颗粒递送基因短片段的研究367
第五节展望与不足371
参考文献372
第十三章病毒及病毒样颗粒作为新型功能纳米元/器件375
第一节病毒及病毒样颗粒与量子点375
一、量子点概述375
二、病毒及病毒样颗粒-量子点复合物378
三、病毒及病毒样颗粒-量子点复合物的研究进展379
第二节病毒及病毒样颗粒与金纳米颗粒385
一、金纳米颗粒概述385
二、病毒及病毒样颗粒-金纳米颗粒复合物的研究进展385
第三节病毒及病毒样颗粒在磁共振成像中的应用394
一、磁共振成像概述394
二、VNP/VLP与T1造影剂397
三、VNP/VLP与T2造影剂400
第四节病毒样颗粒与多模态成像404
一、多模态成像概述404
二、VNP/VLP在多模态成像中的应用406
三、展望410
参考文献410
第十四章病毒样颗粒在基础研究中的应用413
第一节病毒样颗粒的结构解析413
一、戊型肝炎病毒样颗粒的结构413
二、尼帕病毒样颗粒的结构415
三、β-诺达病毒样颗粒的结构416
四、猪圆环病毒样颗粒的结构418
五、柯萨奇B3病毒样颗粒的结构419
六、展望420
第二节病毒样颗粒的组装机制研究421
一、静电作用力421
二、渗透压422
三、核酸片段423
四、温度和pH425
五、热休克蛋白426
六、谷胱甘肽426
七、展望427
第三节病毒样颗粒模拟病毒的研究427
一、病毒样颗粒模拟病毒的生命周期428
二、病毒样颗粒模拟病毒的组织嗜性429
三、病毒样颗粒模拟病毒活化免疫应答430
四、展望433
参考文献433
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