本书第二版被评为“十二五”普通高等教育本科国家级规划教材,是王金发教授主持编写的《细胞生物学》配套实验教材。第三版在2011年出版的《细胞生物学实验教程》(第二版)基础上重新修订而成,全书包括7章共52个实验,内容既保留了细胞生物学研究领域中常用的部分经典实验,又增加了许多与现代细胞生物学、分子生物学相关的新技术,包括细胞骨架的荧光染色、细胞核的荧光标记、膜组分的分离、小鼠睾丸组织染色体标本的制备、植物多倍体的诱发与鉴定、细胞增殖检测系列实验、细胞衰老检测、DNA ladder检测细胞凋亡、Annexin V/PI染色的流式细胞术检测细胞凋亡、动物细胞转染、原生质体的转化、大肠杆菌感受态细胞的制备及转化、质粒DNA的提取与电泳检测、植物细胞叶绿体DNA的分离纯化、报告基因的PCR鉴定、蛋白质电泳及免疫印迹技术、温和蓝绿胶电泳技术等。
样章试读
目录
- 目录
第三版前言
第一章 细胞的形态与结构 1
实验1 光学显微镜的构造原理及使用方法 1
实验2 切片标本的观察 12
实验3 原生质体的制备与观察 14
实验4 细胞膜的荧光染色 19
实验5 细胞骨架的化学染色 21
实验6 细胞骨架的荧光染色 23
实验7 线粒体的活体染色 25
实验8 叶绿体的荧光成像 26
实验9 细胞多糖的化学染色 28
实验10 过氧化物酶体染色 31
实验11 细胞核的化学染色 32
实验12 细胞核的荧光标记 35
第二章 细胞组分的分离 37
实验13 差速离心分离细胞核与线粒体 37
实验14 试剂盒分离细胞线粒体 39
实验15 完整叶绿体的分离 41
实验16 膜组分的分离 44
第三章 细胞与组织培养技术 47
实验17 细胞计数与存活率检测 47
实验18 动物细胞传代培养 50
实验19 动物细胞的冻存与复苏 54
实验20 植物组织培养技术 56
第四章 细胞分裂与染色体 62
实验21 端粒的标记与观察 62
实验22 外周血淋巴细胞中期染色体的制备 64
实验23 动物骨髓细胞中期染色体的观察 67
实验24 小鼠睾丸组织染色体标本的制备 71
实验25 染色体核型分析 72
实验26 果蝇唾腺染色体标本制备和染色体特征观察 74
实验27 减数分裂染色体的观察 76
实验28 植物多倍体的诱发与鉴定 81
实验29 环境因素诱变染色体改组的观察 84
第五章 细胞增殖与细胞衰老 88
实验30 细胞增殖检测—DNA合成检测 88
实验31 细胞增殖检测—代谢活性检测 94
实验32 细胞增殖检测—细胞增殖相关抗原检测 96
实验33 细胞衰老检测—β-半乳糖苷酶法 100
第六章 细胞凋亡 103
实验34 细胞凋亡的形态学检测—DAPI染色法 103
实验35 DNA ladder检测细胞凋亡 108
实验36 Annexin V/PI染色的流式细胞术检测细胞凋亡 110
第七章 细胞工程与分子生物学实验技术 117
实验37 酶联免疫吸附分析 117
实验38 单克隆抗体技术 120
实验39 流式细胞术的原理与应用 122
实验40 动物细胞转染 129
实验41 原生质体的转化 132
实验42 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 134
实验43 动物基因组DNA的提取 137
实验44 植物基因组DNA的提取 142
实验45 质粒DNA的提取与电泳检测 147
实验46 线粒体DNA的提取 152
实验47 植物细胞叶绿体DNA的分离纯化 156
实验48 RNA的提取与电泳检测 158
实验49 PCR与实时定量PCR 162
实验50 报告基因的PCR鉴定 166
实验51 蛋白质电泳及免疫印迹技术 168
实验52 温和蓝绿胶电泳技术 173
主要参考文献 178
附录 180
附录1 离心机转速与离心力的换算 180
附录2 常用试剂配方 180
附录3 常用缩写 181