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内容简介
本书是我国近年来编写的第一本核酸研究方面的方法书。分两册出版，上册为核酸的制备、鉴定与核苷酸序列分析；下册为基因工程分子克隆技术与基因表达。上册包括七个部分，内容以介绍近年来新的研究方法为主，对所有研究方法都作了详细具体的叙述，并分别阐明了方法原理及应用范围等。可供生物、农、医等有关研究人员和高等院校有关专业师生参考。
目录
- 第一部分 DNA的提取与纯化
引言
第一章 细胞总DNA的分离提取 袁建刚
第一节 从培养的动物细胞中提取高分子量DNA
第二节 细菌细胞DNA的提取
第三节 从动物组织制备高分子量DNA
第二章 DNA的羟基磷灰石柱层析与DNA复性研究方法 袁建刚
第一节 DNA的羟基磷灰石柱层析
第二节 DNA复性动力学简介
第三节 与DNA复性研究有关的一些实验方法
第三章 质粒DNA的大量抽提与纯化 王年
引言
第一节 菌体的培养和质粒DNA的扩增
第二节 菌体的裂解
第三节 质粒DNA的纯化
第四章 λ噬菌体DNA的制备 强伯勤
第一节 裂解生长的λ噬菌体的感染及其纯化
第二节 溶原型噬菌体的诱导及其纯化
第三节 λDNA的抽提
第五章 动物病毒的组织培养及核酸提取 王淑凤
第一节 动物病毒的组织培养技术
第二节 病毒的提纯和病毒核酸的提取
第三节 病毒培养常用溶液的配制
参考文献
第二部分 真核生物mRNA的分离、纯化与鉴定
引言
第一章 真核生物mRNA的分离与纯化 张福徽
第一节 从聚核蛋白体中分离RNA
第二节 从细胞内直接分离RNA
第三节 mRNA的纯化
第四节 注意事项
第二章 mRNA的鉴定 张福徽
第一节 琼脂糖凝胶电泳法
第二节 无细胞体系蛋白质的生物合成
第三节 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析
第四节 免疫沉淀法
参考文献
第三部分 限制性内切酶及其应用
第一章 限制性内切酶 强伯勤 余曙华
第一节 酶的命名、分类和识别特异性
第二节 限制性内切酶的纯化方法
第三节 酶活力的测定和制剂质量检验
第四节 酶的反应条件和影响酶活性的因素
第二章 限制性内切酶的应用 余曙华 强伯勤
第一节 DNA的酶切降解和再连接
第二节 DNA物理图谱分析
第三节 限制性内切酶降解DNA的有关公式
参考文献
第四部分 核酸的凝胶电泳
第一章 DNA的凝胶电泳 杨善蓉
第一节 电泳装置和基本技术
第二节 DNA凝胶电泳的应用
第三节 从凝胶上回收DNA片段
第二章 RNA的电泳 王申五
第一节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第二节 RNA乙二醛变性琼脂糖凝胶电泳
参考文献
第五部分 核苷酸序列分析
第一章 化学法测定DNA的核苷酸序列 黄秉仁 蔡良琬 阎珺
第一节 化学法测定DNA核苷酸序列的基本程序
第二节 设备、材料及使用
第三节 DNA片段的制备
第四节 DNA片段的末端标记
第五节 单末端标记DNA片段的分离和提纯
第六节 特异性的碱基化学裂解反应
第七节 测序胶的制备及电泳
第八节 放射自显影X光片的固定
第九节 化学法测序的改进和展望
第十节 小结
参考文献
第二章 末端终止法测定DNA的核苷酸序列 琦祖和
第一节 概述
第二节 M13mp载体在末端终止法中的应用
第三节 被测DNA的分子克隆
第四节 制备引物
第五节 末端终止法序列测定
第六节 测序用聚丙烯酰胺凝胶电泳
第七节 序列的解读及常见问题
参考文献
第三章 RNA的核苷酸序列测定 程振起 肖啸
第一节 器皿和溶液的准备
第二节 小分子RNA的提取与纯化
第三节 RNA的末端标记及大分子RNA的特异性降解
第四节 序列分析酶解直读法
第五节 化学裂解直读法
第六节 序列分析双向直读法
参考文献
第六部分 核酸的分子杂交
引言
第一章 标记探针的方法 袁建刚
第一节 缺口翻译标记DNA探针
第二节 125I标记RNA和DNA
第二章 液相杂交 袁建刚
第三章 固相杂交 袁建刚
第一节 用于斑点杂交的直接点样法
第二节 DNA的吸印转移
第三节 RNA的吸印转移
第四节 DNA和RNA的电泳转移
第五节 硝酸纤维素膜固相杂交
参考文献
第七部分 核酸的电镜观察与应用
引言
第一章 核酸电镜标本的制作原理及其方法 蔡良琬 梁杰 宋国兴
第一节 基本原理
第二节 支持膜的制作方法及特点
第三节 样品制作方法
第二章 核酸电镜标本的几种制备方法 蔡良琬 梁杰 宋国兴
第一节 对制备核酸电镜标本的质量要求
第二节 病毒DNA与RNA的电镜标本的制备
第三节 DNA-蛋白质复合物的电镜标本的制备
第四节 核酸变性标本的制备
第五节 DNA的暗视野观察
参考文献
附录
一、常用的数据
二、DNA和RNA含量的测定
三、玻璃器皿和塑料器皿的处理
四、有机试剂及其处理
五、透析袋的处理
六、常用的同位素及标记化合物
七、几种常用的酶
八、限制性内切酶
名词缩写
索引
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