在后基因组时代,学界所面临的主要挑战之一是如何破解大量的编码蛋白质的基因功能。在《转基因技术:原理与实验方案》第3版中,该领域的专家在第2版的基础上进行了更新和补充,以求能够详尽地反映当前基因修饰技术的最新进展。本书不仅包括基因修饰小鼠制作过程,同时也介绍了其他模式生物的转基因技术,以及在显微注射、位点特异性重组系统、冷冻保存等方面的探索和尝试。本书秉承Springer《分子生物学方法》系列丛书的一贯风格,阐述明晰、便于使用,每章包括对相关问题的介绍,所需材料和试剂的清单,实验操作的具体步骤,以及常见问题的解决方法和缺陷规避。
样章试读
目录
- 前言
撰稿人
第一部分 多种模式动物的转基因技术
1 转基因果蝇
2 转基因线虫
3 利用Tol2转座子系统制作转基因斑马鱼
4 转基因爪蟾
5 利用DNA前核注射制作转基因大鼠
第二部分 小鼠的转基因技术
6 细胞类型特异的转基因小鼠
7 设计转基因载体和DNA转入基因组-成功的关键
8 过表达转基因-前核显微注射
9 基因打靶载体
10 基因捕获:基因敲除的快速通道
11 小鼠胚胎干细胞的培养
12 打靶胚胎干细胞
13 通过显微注射获得嵌合体小鼠
14 通过桑葚胚细胞聚集获得嵌合体小鼠
15 获得突变体小鼠相关的手术操作
16 用于小鼠基因组修饰相关的位点特异性重组酶
17 Cre转基因小鼠
18 大规模小鼠基因突变
19 小鼠的繁殖和饲养
20 维持和保存实验室变异小鼠的生物学方法Ⅰ:保存突变小鼠株
21 维持和保存实验室变异小鼠的生物学方法Ⅱ:复苏突变小鼠株
索引