微生物学是实践性很强的学科，微生物学实验技术是该学科的重要内容。本书由长期从事微生物教学、科研工作的教师编写，总结了编者多年的实验教学经验和科研成果。本书包括93个实验，共分六大部分：①微生物的形态学研究方法，介绍微生物的制片、染色及形态观察；②微生物的纯培养技术，介绍几种常用培养基的配制、灭菌及微生物接种技术；③微生物的营养及环境条件，介绍微生物的培养及生长条件；④微生物的分离与纯化，介绍微生物的分离、纯化、形态鉴定、生理生化鉴定和分子鉴定操作技术；⑤微生物育种技术与菌种保藏，介绍微生物的遗传、育种、菌种保藏实验操作方法；⑥应用微生物实验，包括不同环境中（土壤、水体、食品）微生物的检测、微生物细胞的荧光标记、酶活性检测等研究技术，培养学生的综合实践能力。
样章试读
目录
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第一部分 微生物的形态学研究方法
Ⅰ 微生物的形态观察 1
—、细菌的形态观察 1
实验一 普通光学显微镜的使用及活细菌观察 1
实验二 细菌的简单染色和革兰氏染色 5
实验三 细菌的荚膜染色 8
实验四 细菌的芽孢染色 10
实验五 细菌的鞭毛染色（附细菌的运动性观察） 11
实验六 蓝细菌的培养与观察 15
二、放线菌形态观察 16
实验七 用玻璃纸琼脂平板透析培养法观察放线菌形态 16
实验八 用插片培养法观察放线菌的形态 16
实验九 放线菌的印片染色法 17
三、真菌的形态观察 18
实验十 霉菌形态及无性孢子的观察 18
实验十一 霉菌封闭标本的制备 19
实验十二 霉菌接合孢子的培养与观察 20
实验十三 酵母菌子囊孢子的培养与观察 21
实验十四 伞菌担子和担孢子的压片观察 22
实验十五 镰刀菌分生孢子的培养与观察 22
四、病毒的形态观察 23
实验十六 昆虫病毒多角体的染色与观察 23
实验十七 噬菌斑的培养与观察 24
五、藻类和原生动物的形态观察 25
实验十八 衣藻和水绵的形态观察 25
实验十九 草履虫和眼虫的培养与观察 27
实验二十变形虫的培养与观察 28
Ⅱ 微生物的大小与数量测定 30
实验二十一 微生物细胞大小的测定 30
实验二十二 微生物细胞的显微直接计数法 32
实验二十三 稀释平板测数法 34
实验二十四 稀释培养计数 36
实验二十五 比浊法测定大肠杆菌的生长曲线 39
第二部分 微生物的纯培养技术
Ⅰ 培养基的制备 41
一、培养基的配制方法 41
二、几种常用培养基的配制 43
实验二十六 牛肉膏蛋白胨培养基的制备 43
实验二十七 高氏一号合成培养基的制备 44
实验二十八 马丁-孟加拉红培养基的制备 45
实验二十九 马铃薯蔗糖琼脂培养基的制备 46
实验三十 土壤浸出液培养基的制备 47
实验三十一 麦芽汁培养基和米曲汁培养基的制备 48
实验三十二 明胶培养基的制备 49
实验三十三 石蕊牛乳培养基的制备 49
Ⅱ 灭菌和消毒 51
—、干热灭菌法 51
二、湿热灭菌法 52
三、过滤除菌 57
四、紫外线杀菌 58
五、化学药剂消毒杀菌 58
Ⅲ 微生物接种技术 60
一、接种前的准备工作 60
二、几种常用的接种技术 62
第三部分微生物的营养与环境条件
实验三十四 营养元素对微生物生长的影响 65
实验三十五 氧气对微生物生长的影响 66
实验三十六 温度对微生物生长的影响 66
实验三十七 pH对微生物生长的影响 67
实验三十八 紫外线杀菌实验 68
实验三十九 化学药剂对微生物的作用 70
实验四十微生物的抬抗实验 71
实验四十一 微生物的耐盐性实验 71
第四部分 微生物的分离与纯化
Ⅰ 微生物纯培养分离纯化的一 般方法 73
实验四十二 土壤中好气性细菌的分离与计数（附划线分离法） 73
实验四十三 厌氧细菌的分离培养 75
实验四十四 土壤中纤维素分解菌的分离培养 76
实验四十五 土壤中的固氮菌的分离培养 78
实验四十六 豆科植物根瘤中根瘤菌的分离 79
实验四十七 死虫中苏云金芽孢杆菌的分离 80
实验四十八 土壤中有机磷农药降解菌的分离 81
实验四十九 土壤中放线菌的分离与计数 82
实验五十 土壤中真菌的分离与计数 83
实验五十一 酒曲中酵母菌的分离 84
实验五十二 担子菌的弹射分离 84
实验五十三 土壤中丛枝菌根真菌的筛选分离 85
实验五十四 自然环境中噬菌体的分离 86
实验五十五 土壤中藻类的分离 87
实验五十六 土壤中原生动物的分离 89
Ⅱ 微生物的形态鉴定方法 91
实验五十七 各类微生物菌落的识别 91
Ⅲ 微生物的生理鉴定常规实验 93
实验五十八 微生物对含碳化合物的分解和利用 93
唯一碳源实验 93
糖、醇、糖苷类碳源的分解实验 93
淀粉水解实验 94
纤维素分解实验 95
果胶分解实验 96
油脂水解实验 96
甲基红(M.R.)实验 97
乙酰甲基甲醇（V.P.)实验 97
柠檬酸盐实验 98
实验五十九 微生物对含氮化合物的分解和利用 99
唯一氮源实验（无机氮） 99
明胶液化实验 100
石蕊牛乳实验 100
产氨实验 101
产硫化氢实验 102
硝酸盐还原实验 103
吲哚实验 104
实验六十 微生物的产酶实验 105
过氧化氢酶实验 105
苯丙氨酸脱氨酶实验 106
卵磷脂酶实验 106
实验六十一 利用BIOLOG系统进行微生物的分类鉴定 107
Ⅳ 微生物的血清学鉴定 110
实验六十二 抗血清制备 110
实验六十三 直接凝集反应 112
实验六十四 免疫电泳 115
实验六十五 双向免疫扩散 116
Ⅴ 微生物的分子鉴定 118
实验六十六 细菌总DNA的提取 118
实验六十七 PCR扩增细菌16S rRNA序列
第五部分 微生物育种技术和菌种保藏
实验六十九三 亲本杂交 124
实验七十细菌的专性转导 125
实验七十一 细菌的转座突变 129
实验七十二 细菌的互补测验 130
实验七十三 大肠杆菌的中断杂交实验 131
实验七十四 紫外线诱变技术及营养缺陷型突变株的筛选 134
实验七十五 亚硝酸诱变技术及乳糖发酵突变株的筛选 137
实验七十六 原生质体融合 139
实验七十七 脉孢菌的分离和交换 141
实验七十八 微生物菌种保藏 143
第六部分 应用微生物实验
实验七十九 豆科植物根瘤的固氮酶活性测定 150
实验八十 根瘤菌的荧光标记及检测 152
实验八十一 泡囊丛枝状菌根的染色 154
实验八十二 苏云金芽孢杆菌杀虫剂的生物测定 155
实验八十三 抗生素的效价测定（管碟法） 158
实验八十四 棉铃虫核多角体病毒的室内培养及效价测定 160
实验八十五 乙醇发酵（附巴斯德效应） 162
实验八十六 乳酸发酵 165
实验八十七 酸奶制作 166
实验八十八 水中细菌总数和大肠菌群的检测 168
实验八十九 食品中菌落总数和大肠菌群的检测 175
实验九十 食品中沙门氏菌的检测 179
实验九十一 环境微生物细胞的固定化技术 184
实验九十二 产蛋白酶和淀粉酶芽孢杆菌的分离和酶活力检测 185
实验九十三 利用PCR-DGGE方法对土壤微生物群落多样性的检测 188
主要参考文献 194
附录一 微生物实验课常用玻璃器皿的清洁法 195
附录二 教学常用菌种 198
附录三 常用培养基配方 200
附录四 常用染色液的配制 222
附录五 缓冲液的配制 227
附录六 常用试剂和指示剂的配制 232
附录七 微生物混浊度计数法麦兰云度计的配制与菌数对照表 235
附录八 几种法定单位的名称与换算 236
附录九 最大或然数统计表 238
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