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精编蛋白质科学实验指南


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精编蛋白质科学实验指南
  • 书号:9787030180865
    作者:[美]J E.科林根等著; 李慎涛
  • 外文书名:Short Protocols in Protein Science
  • 装帧:平装
    开本:16开
  • 页数:784
    字数:1114000
    语种:中文
  • 出版社:科学出版社
    出版时间:2007-01-11
  • 所属分类:
  • 定价: ¥248.00元
    售价: ¥248.00元
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  本书是《最新蛋白质科学实验指南》(Current Protocols in Protein Science;CPPS)一书的精编版本,内容全部取材于该书和每季度更新的服务手册,其详细提供了多种实验方案,并包含实验材料、步骤和每种技术的参考文献等信息,可使有经验的研究人员将其作为独立的实验室指南来使用。
  由于蛋白质具有多样性,其分析也必须包括很广范的结构和理化方法,因此每个研究人员都必须尽可能多地掌握最新方法和传统方法。本指南中既包括特定的详细方案,也包括使方法适应手头特定项目的策略,相信能够有助于读者进一步深入进行蛋白质科学和相关领域的研究。
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    推荐的背景读物
    第1章 蛋白质纯化和定性的策略
    1.1单元 蛋白质纯化和定性概述
    1.2单元 蛋白质纯化流程图
    第2章 计算分析
    2.1单元 用于蛋白质序列分析的疏水分布图
    2.2单元 蛋白质二级结构预测
    2.3单元 使用BLAST程序家族进行序列相似性搜索
    2.4单元 因特网上的蛋白质数据库
    2.5单元 蛋白质三级结构预测
    2.6单元 蛋白质三级结构建模
    2.7单元 比较蛋白质结构预测
    第3章 检测和分析方法
    3.1单元 分光光度法确定蛋白质浓度
    3.2单元 定量氨基酸分析
    3.3单元 肽和蛋白质的体外放射标记
    3.4单元 总蛋白质的分析
    3.5单元 溶液中和细胞表面上蛋白质的生物素化
    3.6单元 用氨基酸进行代谢标记
    第4章 提取、稳定和浓缩
    4.1单元 用透析和超滤法脱盐、浓缩和更换缓冲液
    4.2单元 蛋白质的选择性沉淀
    4.3单元 蛋白质的长期保存
    第5章 重组蛋白的生产
    5.1单元 在大肠杆菌中生产重组蛋白
    5.2单元 大肠杆菌表达系统的选择
    5.3单元 最适宜于蛋白质生产的大肠杆菌的发酵和生长
    5.4单元 在杆状病毒系统中的蛋白质表达
    5.5单元 用于生产外源蛋白质的酵母培养
    5.6单元 哺乳动物细胞蛋白质表达的概况
    5.7单元 在哺乳动物细胞中生产重组蛋白
    5.8单元 细胞培养物和痘病毒贮液的制备
    5.9单元 重组痘病毒的构建
    5.10单元 细胞蛋白质表达系统的选择
    5.11单元 使用Gateway系统在多种宿主中进行蛋白质表达
    第6章 重组蛋白的纯化
    6.1单元 在大肠杆菌中生产的重组蛋白的纯化概述
    6.2单元 从大肠杆菌中制备可溶性蛋白质
    6.3单元 从大肠杆菌中制备和提取不溶性(包含体)蛋白质
    6.4单元 蛋白质折叠概述
    6.5单元 大肠杆菌不溶性(包含体)蛋白质的折叠和纯化
    6.6单元 GST融合蛋白的表达和纯化
    6.7单元 硫氧还蛋白融合蛋白的表达和纯化
    第7章 重组蛋白的定性
    7.1单元 重组蛋白定性概述
    7.2单元 用紫外吸收光谱法测定重组蛋白的一致性和纯度
    7.3单元 测定重组蛋白的一致性和结构
    7.4单元 横向尿素梯度电泳
    7.5单元 分析型超速离心
    7.6单元 测定蛋白质的圆二色谱
    7.7单元 测定蛋白质的荧光光谱法
    7.8单元 用差示扫描量热法测量蛋白质的热稳定性
    7.9单元 用HPLC凝胶过滤和质谱法对蛋白质进行定性
    第8章 常规层析分离
    8.1单元 常规层析概述
    8.2单元 离子交换层析
    8.3单元 凝胶过滤层析
    8.4单元 疏水相互作用层析
    8.5单元 肽和蛋白质的HPLC
    第9章 亲和层析
    9.1单元 凝集素亲和层析
    9.2单元 染料亲和层析
    9.3单元 天然配体的亲和纯化
    9.4单元 金属螯合亲和层析(MCAC)
    9.5单元 免疫亲和层析
    9.6单元 免疫沉淀
    第10章 电泳
    10.1单元 蛋白质的单向SDS凝胶电泳
    10.2单元 非变性条件的单向凝胶电泳
    10.3单元 双向凝胶电泳
    10.4单元 利用固定法检测凝胶中的蛋白质
    10.5单元 聚丙烯酰胺凝胶电印迹
    10.6单元 检测印迹膜上的蛋白质
    10.7单元 免疫印迹检测
    第11章 化学分析
    11.1单元 溶液中蛋白质的酶解
    11.2单元 在PVDF膜上酶解蛋白质
    11.3单元 测序用蛋白质的胶中消化
    11.4单元 溶液中蛋白质的化学切割
    11.5单元 膜上蛋白质的化学切割
    11.6单元 反相HPLC分离肽
    11.7单元 N端序列分析
    第12章 翻译后修饰:糖基化
    12.1单元 N糖基化的抑制
    12.2单元 N连接寡糖的内切糖苷酶和糖胺酶的释放
    12.3单元 蛋白质上糖磷脂锚的检测
    第13章 翻译后修饰:磷酸化和磷酸酶
    13.1单元 用32Pi标记培养细胞及制备用于免疫沉淀的细胞裂解物
    13.2单元 磷酸氨基酸的分析
    13.3单元 用免疫学技术检测磷酸化
    13.4单元 用酶学技术检测磷酸化
    13.5单元 用透化处理的策略研究蛋白质的磷酸化
    13.6单元 磷酸肽作图及磷酸化位点的鉴定
    第14章 翻译后修饰:特定的应用
    14.1单元 二硫键形成的分析
    14.2单元 蛋白质酰化的分析
    14.3单元 蛋白质异戊烯化和羧甲基化的分析
    14.4单元 蛋白质氧化修饰的分析
    14.5单元 蛋白质泛素化的分析
    第15章 蛋白质的化学修饰
    15.1单元 半胱氨酸的修饰
    15.2单元 氨基的修饰
    第16章 质谱
    16.1单元 肽和蛋白质质谱分析综述
    16.2单元 肽和蛋白质MALDI质量分析用样品的制备
    16.3单元 用于MALD-MS指纹图蛋白质的凝胶内消化
    16.4单元 在网上搜索序列数据库:用MS-Fit鉴定蛋白质
    16.5单元 在网上搜索序列数据库:用MS-Tag鉴定蛋白质
    16.6单元 使用纳升喷雾连接装置将样品直接导入电喷雾离子化质谱仪中
    16.7单元 使用微型毛细管液相色谱将样品直接导入电喷雾离子化质谱仪中
    16.8单元 用四极杆离子阱质谱和SEQUEST数据库匹配鉴定蛋白质
    16.9单元 通过手工解释MS/MS谱进行从头肽测序
    第17章 肽的制备和处理
    17.1单元 在塑料针上合成多种肽
    17.2单元 用于生产识别完整蛋白质的抗体的合成肽
    17.3单元 作为蛋白质模拟物的肽树枝状高分子的合成和应用
    17.4单元 肽二硫键的形成
    第18章 蛋白质互相作用的鉴定
    18.1单元 蛋白质蛋白质相互作用的分析
    18.2单元 用相互作用阱/双杂交系统鉴定相互作用的蛋白质
    18.3单元 用基于噬菌体的表达克隆鉴定相互作用的蛋白质
    18.4单元 用共沉淀法检测蛋白质蛋白质相互作用
    18.5单元 用酵母双杂交芯片高通量筛选蛋白质蛋白质相互作用
    18.6单元 用far-Western分析鉴定蛋白质的相互作用
    18.7单元 用于研究生物分子相互作用的闪烁邻近分析法(SPA)
    第19章 蛋白质相互作用的定量
    19.1单元 蛋白质相互作用定量的概述
    19.2单元 滴定量热法(titration-calorimetry)
    19.3单元 用于测量蛋白质缔合平衡的缩比大区带分析型凝胶过滤层析
    19.4单元 带在线式光散射的分子排阻层析
    第20章 肽酶
    20.1单元 蛋白酶
    20.2单元 酿酒酵母蛋白酶体的纯化和定性
    20.3单元 真核生物20S蛋白酶体的纯化
    20.4单元 丝氨酸蛋白酶抑制剂
    20.5单元 用GFP作为报道蛋白分析序列特异性蛋白酶
    20.6单元 活性丝氨酸蛋白酶及其变异体的过表达和从大肠杆菌包含体中的纯化
    20.7单元 在细胞环境中分析蛋白酶
    20.8单元 caspase的表达、纯化和定性
    第21章 基于凝胶的蛋白质组分析
    21.1单元 使用双向差异凝胶电泳(2DDIGE)确定蛋白质谱
    21.2单元 用于蛋白质组分析的激光捕获显微分离技术
    附录1 试剂和溶液
    附录2 常用的度量制和数据
    附录3 常用技术
    附录3A 蛋白质折叠剂的使用
    附录3B 透析
    附录3C 玻璃器具硅烷化
    附录3D 使用硫酸铵的蛋白质沉淀
    附录3E 琼脂糖凝胶电泳
    附录3F 用吸收光谱法进行核酸定量
    附录4 试剂和设备供货商
    参考文献
    索引
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