生物化学及分子生物学是一门实践性极强的学科,纵观学科发展历史,糖、脂肪、蛋白质与核酸研究的发展,均是在实验研究基础上建立,近代分子生物学的奠基石之一的双螺旋结构学说更是在众多实验成果以及Watson和Crick研究总结的基础上提出的,很难设想没有实验研究,生化及分子生物学会发展成今天的生物医学学科的领头羊地位。本教材中首先打破实验教学依附于理论教学的传统模式,重新确定实验教学的地位。打破传统的以验证性实验为主的框架,建立新的实验比例,即综合性、设计性比例为主,使学生在掌握基本实验技术的基础上,动手操作一些综合性的大实验,提高学生综合分析能力及实验动手能力。
样章试读
目录
第 1篇 总 论
实验须知(1)
第 1章 基本操作技术(3)
第1节 玻璃器皿的清洗(3)
第2节 吸量管的种类和使用(4)
第3节 溶液的混匀、过滤及离心 (5)
第4节 实验样品的制备(6)
第5节 分光光度法(8)
第 2章 电泳技术(13)
第1节 电泳的基本原理(13)
第2节 影响电泳的主要因素(13)
第3节 区带电泳的分类(14)
第4节 几种常见的电泳方法(15)
第5节 二维电泳(19)
第 3章 层析技术(24)
第1节 层析技术的分类(24)
第2节 层析中的常用术语(24)
第3节 纸层析(27)
第4节 薄层层析(28)
第5节 离子交换层析(28)
第6节 凝胶层析(30)
第7节 亲和层析(33)
第 4章 离心分离技术(34)
第1节 离心分离技术的原理(34)
第2节 离心机的使用方法与维护(35)
第3节 离心技术的分类与选择(36)
第4节 离心机转子的种类与应用(38)
第 5章 印迹技术(40)
第1节 Southern印迹杂交(40)
第2节 Northern印迹杂交(41)
第3节 斑点杂交(42)
第4节 Western印迹杂交(42)
第 6章 聚合酶链式反应(44)
第1节 PCR技术概述(44)
第2节 PCR技术的基本原理(44)
第3节 PCR反应条件的优化(46)
第4节 PCR技术的扩展(49)
第5节 PCR中应注意的问题(52)
第6节 PCR在医学中的应用(54)
第 2篇 各 论
第 7章 蛋白质与氨基酸(55)
实验1 蛋白质含量的测定(55)
实验2 凝胶层析法分离血红蛋白和DNP-鱼精蛋白(或DNP-酪蛋白)(59)
实验3 酪蛋白等电点的测定(62)
实验4 氨基酸的薄层层析(63)
实验5 DNS-氨基酸聚酰胺薄膜双向层析(65)
第 8章 酶学(68)
实验6 影响酶活性的因素(68)
实验7 蔗糖酶的专一性(69)
实验8 丙氨酸转氨酶活性的测定 (72)
实验9 乳酸脱氢酶同工酶的分离
(74)
实验10 转氨基反应(76)
实验11 琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制(78)
实验12 米氏常数的测定(80)
第 9章 糖、脂和生物氧化(88)
实验13 饥饿和饱食对肝糖原含量的影响(88)
实验14 血清甘油三酯测定(89)
实验15 高密度脂蛋白中胆固醇含量测定(91)
实验16 血清总胆固醇含量测定 (93)
实验17 乳酸测定(95)
实验18 血中葡萄糖含量的测定 (99)
第 10章 核酸(103)
实验19 细胞核的分离和纯化(103)…
实验20 核酸含量的测定(105)
实验21 酵母RNA的提取及组分鉴定 (108)
实验22 真核细胞基因组DNA的制备与定量(110)
实验23 Southern印迹杂交(111)
实验24 Northern印迹杂交(117)
实验25 PCR扩增技术(120)
实验26 随机扩增多态性DNA技术
(122)
第 11章 综合性实验(124)
实验27 血清γ-球蛋白分离与纯度鉴定(124)
实验28 蛋白质的分离、提取、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western印迹(127)
实验29 脂蛋白的分离、提纯和电泳鉴定(136)
实验30 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞、提取、纯化鉴定(140)…
实验31 碱性磷酸酶的纯化及比活性和 Km值的测定(146)
实验32 血清中鞘糖脂的分离与质谱分析(150)
参考文献(154)
附录一(155)
附录二(169) ]]>